RNAclean Kit

A-1 Sel lisis atau homogenisasi tidak cukup

---- Mengurangi penggunaan sampel, meningkatkan jumlah buffer lisis, meningkatkan homogenisasi dan waktu lisis.

A-2 Jumlah sampel terlalu besar

---- Kurangi jumlah sampel yang digunakan atau tambah jumlah buffer lisis.

A-1 Lisis atau homogenisasi sel tidak mencukupi

---- Mengurangi penggunaan sampel, meningkatkan jumlah buffer lisis, meningkatkan homogenisasi dan waktu lisis.

A-2 Jumlah sampel terlalu besar

---- Silakan lihat kapasitas pemrosesan maksimum.

A-3 RNA tidak dielusi sepenuhnya dari kolom

---- Setelah menambahkan air bebas RNase, biarkan selama beberapa menit sebelum disentrifugasi.

A-4 Etanol dalam eluen

---- Setelah dibilas, sentrifus lagi dan buang buffer pencuci sebanyak mungkin.

A-5 Media kultur sel tidak sepenuhnya dihilangkan

---- Saat mengumpulkan sel, pastikan untuk membuang media kultur sebanyak mungkin.

A-6 Sel-sel yang disimpan di RNAstore tidak disentrifugasi secara efektif

---- RNAstore kepadatan lebih besar dari media kultur sel rata-rata; sehingga gaya sentrifugal harus ditingkatkan. Disarankan untuk sentrifugasi pada 3000x g.

A-7 Kandungan RNA rendah dan kelimpahan dalam sampel

---- Gunakan sampel positif untuk menentukan apakah hasil rendah disebabkan oleh sampel.

A-1 Bahannya tidak segar

---- Jaringan segar harus segera disimpan dalam nitrogen cair atau segera dimasukkan ke dalam reagen RNAstore untuk memastikan efek ekstraksi.

A-2 Jumlah sampel terlalu besar

---- Kurangi jumlah sampel.

Kontaminasi A-3 RNasen

---- Meskipun buffer yang disediakan dalam kit tidak mengandung RNase, RNase mudah terkontaminasi selama proses ekstraksi dan harus ditangani dengan hati-hati.

A-4 Polusi elektroforesis

---- Ganti buffer elektroforesis dan pastikan bahan habis pakai dan Loading Buffer bebas dari kontaminasi RNase.

A-5 Terlalu banyak pembebanan untuk elektroforesis

---- Kurangi jumlah pemuatan sampel, pemuatan setiap sumur tidak boleh melebihi 2 g.

A-1 Jumlah sampel terlalu besar

---- Kurangi jumlah sampel.

A-2 Beberapa sampel memiliki kandungan DNA yang tinggi dan dapat diobati dengan DNase.

---- Lakukan perawatan DNase Bebas RNase ke larutan RNA yang diperoleh, dan RNA dapat langsung digunakan untuk eksperimen selanjutnya setelah perawatan, atau dapat dimurnikan lebih lanjut dengan kit pemurnian RNA.

Untuk barang pecah belah, panggang pada suhu 150 °C selama 4 jam. Untuk wadah plastik, direndam dalam 0,5 M NaOH selama 10 menit, kemudian dibilas dengan air bebas RNase dan kemudian disterilkan untuk menghilangkan RNase sepenuhnya. Reagen atau larutan yang digunakan dalam percobaan, terutama air, harus bebas dari RNase. Gunakan air bebas RNase untuk semua persiapan reagen (tambahkan air ke botol kaca bersih, tambahkan DEPC ke konsentrasi akhir 0,1% (V/V), kocok semalaman dan autoklaf).