Sel TGuide/Kit DNA Genomik Jaringan

A-1 Konsentrasi sel atau virus yang rendah dalam sampel awal —Memperkaya konsentrasi sel atau virus.

A-2 Lisis sampel yang tidak mencukupi —Sampel belum dicampur secara menyeluruh dengan buffer lisis. Disarankan untuk mencampur secara menyeluruh dengan pulse-vortexing selama 1-2 kali. —Lisis sel yang tidak memadai yang disebabkan oleh penurunan aktivitas proteinase K. —Lisis sel yang tidak memadai atau degradasi protein karena waktu mandi air hangat yang tidak mencukupi. Disarankan untuk memotong jaringan menjadi potongan-potongan kecil dan memperpanjang waktu mandi untuk menghilangkan semua residu dalam lisat.

A-3 Adsorpsi DNA tidak mencukupi. —Tidak ada etanol atau persentase rendah sebagai pengganti etanol 100% yang ditambahkan sebelum lisat dipindahkan ke kolom spin.

A-4 Nilai pH buffer elusi terlalu rendah. —Sesuaikan pH antara 8,0-8,3.

Etanol sisa dalam eluen.

—Ada sisa buffer pencuci PW dalam eluen. Etanol dapat dihilangkan dengan sentrifugasi kolom spin selama 3-5 menit, dan kemudian ditempatkan pada suhu kamar atau 50℃ inkubator selama 1-2 menit.

A-1 Sampel tidak segar. —Ekstrak DNA sampel positif sebagai kontrol untuk menentukan apakah DNA dalam sampel telah terdegradasi.

A-2 Pra-perawatan yang tidak tepat. —Disebabkan oleh penggilingan nitrogen cair yang berlebihan, perolehan kembali kelembapan, atau jumlah sampel yang terlalu besar.

Pretreatment harus bervariasi untuk sampel yang berbeda. Untuk sampel tanaman, pastikan untuk benar-benar menggiling dalam nitrogen cair. Untuk sampel hewan, homogenkan atau giling secara menyeluruh dalam nitrogen cair. Untuk sampel dengan dinding sel yang sulit dipecah, seperti bakteri G+ dan khamir, disarankan untuk menggunakan metode lisozim, litikase atau mekanis untuk memecah dinding sel.

4992201/4992202 Kit DNA Genomik Tanaman mengadopsi metode berbasis kolom yang membutuhkan kloroform untuk ekstraksi. Sangat cocok untuk berbagai sampel tanaman, serta bubuk kering tanaman. Hi-DNAsecure Plant Kit juga berbasis kolom, tetapi tidak memerlukan ekstraksi fenol/kloroform, sehingga aman dan tidak beracun. Sangat cocok untuk tanaman dengan kandungan polisakarida dan polifenol yang tinggi. 4992709/4992710 Sistem Pabrik DNAquick mengadopsi metode berbasis cairan. Ekstraksi fenol/kloroform juga tidak diperlukan. Prosedur pemurniannya sederhana dan cepat tanpa batasan jumlah awal sampel, sehingga pengguna dapat menyesuaikan jumlah secara fleksibel sesuai dengan persyaratan eksperimental. Fragmen gDNA berukuran besar dapat diperoleh dengan hasil yang tinggi.

DNA genom diekstraksi dari volume yang berbeda dari sampel darah utuh manusia oleh TIANamp Blood DNA Kit. Hasilnya adalah sebagai berikut. Hasil dicantumkan sebagai referensi saja, hasil ekstraksi yang sebenarnya tergantung pada kondisi sampel.

Ekstraksi DNA bekuan darah dapat dilakukan dengan menggunakan reagen yang disediakan dalam dua kit ini hanya dengan mengubah protokol menjadi instruksi khusus untuk ekstraksi DNA bekuan darah. Salinan lunak protokol ekstraksi DNA bekuan darah dapat dikeluarkan berdasarkan permintaan.

Suspensi sampel segar dengan 1 ml PBS, normal saline atau buffer TE. Homogenkan sampel dengan homogenizer dan kumpulkan endapan ke dasar tabung dengan sentrifugasi. Buang supernatan, dan suspensi kembali endapan dengan 200 l buffer GA. Pemurnian DNA berikut dapat dilakukan sesuai dengan instruksi.

Untuk pemurnian gDNA dalam sampel plasma, serum dan cairan tubuh, TIANamp Micro DNA Kit direkomendasikan. Untuk pemurnian virus gDNA dari sampel serum/plasma, TIANamp Virus DNA/RNA Kit direkomendasikan. Untuk pemurnian gDNA bakteri dari sampel serum dan plasma, direkomendasikan Kit DNA Bakteri TIANamp (lisozim harus disertakan untuk bakteri positif). Untuk sampel air liur, Kit DNA Hi-Swab dan Kit DNA Bakteri TIANamp direkomendasikan.

Kit Tanaman DNAsecure atau Sistem Tanaman DNAquick direkomendasikan untuk ekstraksi genom jamur. Untuk ekstraksi genom ragi, TIANamp Yeast DNA Kit direkomendasikan (litikase harus disiapkan sendiri).